共刺激分子B7-2基因转染抑制乳腺癌生长和转移的实验研究

摘要

目的:研究B7-2基因转染乳腺癌细胞对人乳腺癌肺转移的影响.方法:设计B7-2内引物,在内引物的5'端引入XbaⅠ、KpnⅠ酶切位点;在基因组B7-2编码基因两端设计外引物.分离人外周血单个核细胞,孵育成簇后提取总RNA,通过RT得到DNA,分别以外引物和内引物PCR扩增出B7-2基因,PCR产物经双酶切装入真核载体pcDNA3.1(+)构建成重组质粒B7-2pcDNA3.1,对重组质粒进行扩增.将重组质粒和空载体转染MD-MBA-231细胞,用FITC anti-human B7-2 antibody标记两组转染细胞和原细胞,流式细胞检测B7-2表达.将B7-2基因转染乳腺癌MD-MBA-231细胞,将MD-MBA-231/B7-2、MD-MBA-231/pcDNA3.1和MD-MBA-231分别接种于BALB/c小鼠皮下,观察B7-2基因转染对肺转移的影响.结果:获得B7-2重组基因,重组基因转染组的B7-2表达阳性率比空载体组和原细胞组分别高出36.77%和51.88%,种植MD-MBA-231/B7细胞株的BALB/c小鼠成瘤率及肺转移率显著低于对照组,HE染色发现淋巴细胞广泛浸润于MD-MBA-231/B7种植的肿瘤及其肺转移灶.结论:B7-2基因通过提高免疫原性抑制乳腺癌的生长及肺转移.