基因转移载体脂质体和重组腺病毒介导碱性磷酸酶基因在B16F1细胞中的表达比较

摘要

目的 :探讨两种基因转移载体脂质体转染的和重组腺病毒收集并转导的SEAP基因在B16F1细胞中的表达动态。方法 :脂质体和质粒DNA复合后 ,转染 10 6 B16F1细胞 ,连续 5d收集并换细胞培养液 ,并检测其中的SEAP酶活性。将重组腺病毒以 10 0 0m .o .i、2 0 0 0m .o .i、3 0 0 0m .o .i、4 0 0 0m .o .i接种B16F1细胞 ,连续 5d收集并换细胞培养液 ,并检测其中SEAP的含量。结果 :随着时间的推移 ,脂质体转染的SEAP的表达逐渐下降 ,由第 1天的 82 1.6μUnit/ml下降到第 5天的 2 75 .2 μUnit/ml。腺病毒转导的SEAP的表达却是逐渐上升。并随接种毒量的增加而上升。且第三、四天表达达最高后 ,能保持较稳定的水平。接种 4 0 0 0m .o .i组 ,SEAP的表达由第 1天的93 .9μUnit/ml上升到第 3天 12 81.1μUnit/ml。到第 5天仍为 12 4 0 .4 μUnit/ml。结论 :脂质体和重组腺病毒作为不同的基因转移载体都能有效地介导外源基因的转移入靶细胞 ,并使外源基因在靶细胞内获得有效地表达。