高表达HAX1对人结肠癌细胞SW480凋亡的影响

摘要

目的观察高表达人血细胞特异蛋白1相关蛋白X-1（haematopoietic cell-specific protein 1-associated pro-tein X-1,HAX1）对结肠癌SW480在化疗药物打击后凋亡的影响。方法构建HAX1高表达的质粒,并瞬时转染入结肠癌细胞SW480中（HAX1组,转染了对照空质粒的结肠癌细胞SW480为CTL组）,24h后加入顺铂（10μg.mL-1）处理细胞约36h,用Sub-G1法及Annexin V-FITC流式检测法检测并比较2组细胞凋亡率的差别。同时用Western blot方法检测转染细胞的HAX1表达情况及凋亡途径相关蛋白caspase-9和PARP的变化。结果顺铂打击36h后,Sub-G1法显示CTL组平均凋亡率为（33.67±2.50）%,HAX1组诱导凋亡率均值（16.33±2.10）%,比CTL组降低（P=0.026）。Annexin V-FITC法检测CTL组凋亡率均值为（46.33±9.30）%,HAX1组凋亡率均值为（24.33±6.10）%。HAX1组比CTL组明显降低（P=0.013）。Western blot证实在细胞高表达HAX1蛋白后,可明显降低caspase-9及PARP的剪切体蛋白的表达。结论高表达HAX1抑制顺铂诱导的SW480细胞凋亡,这种抑制作用是通过降低凋亡途径caspase-9及PARP剪切体表达情况完成的。