一种可联合丙戊酸共同使用提高表达水平的抗凋亡CHO‑K1细胞系的构建方法

摘要

本发明公开了一种可联合丙戊酸共同使用提高表达水平的抗凋亡CHO‑K1细胞系的构建方法，所述构建方法包括如下步骤：(1)在BAK、BAX基因的外显子上分别设计出相应的sgRNA序列；(2)制备PSK‑sgRNA‑BAK、PSK‑sgRNA‑BAX质粒；(3)将质粒转染至CHO‑K1细胞中，之后经过筛选，挑选单克隆；获得不同的细胞系；(4)Western Blot检测；(5)功能鉴定及验证；(6)利用敲除型细胞系构建的外源蛋白表达细胞系能联同丙戊酸一起使用，进一步的提升外源蛋白表达水平。本发明制得的稳定细胞系能够延长其重组蛋白合成时间，获得更多的重组蛋白。