小干扰RNA沉默CIP2A表达阻滞HepG2细胞周期、促进细胞衰老的作用及机制探讨

摘要

目的:观察抑制CIP2A表达对HepG2细胞周期及衰老的影响,并探讨初步机制.方法:运用前期成功构建的重组腺相关病毒载体rAAV2-EGFP-CIP2A shRNA转染肝癌细胞系HepG2,PI单染测定细胞周期,衰老相关β-半乳糖苷酶染色检测阳性细胞率,Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达.结果:病毒感染组与空病毒感染组细胞相比,抑制CIP2A表达后HepG2细胞出现G1期阻滞(69.8％ vs 60.4％,P=0.025),细胞内β-半乳糖苷酶染色阳性比例升高(22.1％ vs 9.6％,P=0.022),细胞周期相关蛋白FoxM1、CDK2、CDK4、cyclin D1及MCM7蛋白表达量降低,而细胞周期负性调控分子p21蛋白表达量增加.结论:抑制CIP2A表达导致HepG2细胞出现细胞周期停滞,细胞衰老增加,其机制可能通过调控细胞周期相关蛋白表达来实现的.