自发恶性转化的大鼠骨髓间充质干细胞基因表达谱的芯片分析

摘要

目的:解析骨髓间充质干细胞(MSCs)作为组织工程种子细胞的自发恶性转化的分子遗传学基础,探讨其临床可用性和安全性.方法:密度梯度离心法和贴壁筛选法联合应用,分离大鼠MSCs,流式细胞仪分析细胞同源性,体外培养6个月后获得自发恶性转化的MSCs.Trizol总RNA抽提法获取足量的RNA,用于MSCs基因表达谱的分析.实时定量RT-PCR法对在自发恶性转化的MSCs中呈差异表达的基因进行扩增和检测,以验证基因芯片分析结果.结果:流式细胞仪检测表明了所分离MSCs的高度同源性.MSCs发生自发恶性转化后,有44条差异表达基因,其中21条基因表达上调,23条基因表达下调.经实时定量RT-PCR检测差异表达基因结果与基因芯片结果一致.结论: Wnt、SHH、Notch、TGFβ/BMPs等信号转导通路上的若干基因在MSCs自发恶性转化中起到重要作用.