基于PI3K/AKT/NF-κB通路探索异紫堇碱抑制子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞增殖、迁移的分子机制

摘要

目的 基于PI3K/AKT通路探索异紫堇碱(ICDE)抑制子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞增殖、迁移的分子机制.方法 噻唑蓝(MTT)法检测ICDE细胞增殖抑制情况;基于MTT实验结果 分组给药;Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况;DNA含量检测试剂盒检测细胞周期;Transwell小室迁移实验检测细胞迁移情况;细胞免疫荧光检测细胞核因子-κ因子(NF-κB)进核情况;Western blotting检测细胞中Bax(Bcl-2 associated X)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、细胞周期素E(Cylin E)、周期素依赖性激酶2(CDK2)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、核因子κB激酶抑制子(IKK)、磷酸化IKK(p-IKK)及细胞核内NF-κB(p65)蛋白的变化.结果ICDE可抑制子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞的增殖、迁移,诱导细胞凋亡、周期阻滞,这种抑制作用可被PI3K激活剂所逆转.在分子水平上,ICDE可降低HEC-1B细胞中Bcl-2、MMP2、MMP9、Cylin E、CDK2、p-PI3K、p-AKT、p-IKK蛋白的表达,抑制NF-κB进核,增加Bax的表达,在加入PI3K激活剂后,ICDE对HEC-1B细胞的蛋白影响作用被逆转,各组细胞中PI3K、AKT、IKK总蛋白无明显变化.结论 ICDE可通过抑制PI3K/AKT/NF-κB通路的激活抑制HEC-1B细胞增殖、迁移,诱导细胞凋亡.