白芍总苷介导TLR4/NF-κB信号通路对类风湿关节炎模型大鼠的治疗作用及其机制

摘要

目的:探讨白芍总苷(TGP)通过调控Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路对类风湿关节炎(RA)大鼠关节情况、炎症因子及凋亡因子的影响,并阐明其作用机制.方法:利用牛Ⅱ型胶原蛋白溶液和完全弗氏佐剂构建胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,将CIA模型大鼠随机分为CIA组、低剂量(25 mg·kg-1)TGP组(TGP-LD组)、中剂量(50 mg·kg-1)TGP组(TGP-MD)和高剂量(100 mg·kg-1)TGP组(TGP-HD组),每组10只;另选取10只健康SD大鼠作为对照组.记录各组大鼠体质量、关节炎指数及关节肿胀度;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)水平;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测各组大鼠关节滑膜组织中TLR4、NF-κB、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA和蛋白表达水平.结果:与对照组比较,CIA组大鼠体质量和关节滑膜组织中Cleaved caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),关节炎指数、关节肿胀度、关节滑膜组织中Bcl-2、TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平,血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显升高(P<0.05).与CIA组比较,不同剂量TGP组大鼠体质量和关节滑膜组织中Cleaved caspase-3及Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),关节炎指数、关节肿胀度、关节滑膜组织中Bcl-2、TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平,血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显降低(P<0.05).与TGP-LD组比较,TGP-MD组和TGP-HD组大鼠体质量和关节滑膜组织中Cleaved caspase-3及Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),关节炎指数、关节肿胀度、关节滑膜组织中Bcl-2、TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平,血清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显降低(P<0.05).结论:TGP可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,改善CIA症状,降低炎症反应,并促进关节滑膜组织细胞的凋亡.