超声靶向破坏微泡技术介导小鼠肝癌细胞株JNK1基因表达、细胞迁移和侵袭抑制

摘要

目的:探讨应用超声靶向破坏微泡(UTMD)技术介导小鼠肝癌细胞株JNK1基因的表达、细胞迁移和侵袭抑制的作用,阐明其作用机制.方法:构建并筛选RNA干扰效果最好的短发夹RNA (shRNA).将小鼠肝癌细胞株Hca-F分为正常Hca-F细胞组、shRNA质粒组、脂质体组、超声微泡结合超声辐照组及脂质体结合超声微泡加超声辐照组.采用倒置荧光显微镜观察各组细胞转染率,荧光定量PCR和Western blotting法检测JNK1基因mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞的细胞活性,应用Transwell实验检测各组细胞的体外迁移能力.结果:脂质体结合超声微泡加超声辐照组细胞转染率高于shRNA质粒组、脂质体组和超声微泡结合超声辐照组(均P＜0.05),脂质体组和超声微泡结合超声辐照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).脂质体结合超声微泡加超声辐照组JNK1 mRNA和蛋白表达水平低于其他各组(P＜0.05);脂质体结合超声微泡加超声辐照组细胞活性和平均穿膜细胞数均低于其他各组(P＜0.05).结论:UTMD技术结合脂质体转染法可以提高小鼠肝癌细胞株JNK1 shRNA的转染效率,增强其对基因表达、细胞活力、迁移和侵袭能力的抑制.