蔬菜中百菌清及其代谢产物残留的ELISA检测方法研究

摘要

以2,4,5-三氯-6-(2-羟基乙氧基)间苯二腈为反应物制备半抗原,利用琥珀酸酐法制备人工抗原.以百菌清-牛血清蛋白(BSA)为免疫原免疫新西兰大白兔,制备特异性兔抗百菌清(CHT)及其代谢产物羟基百菌清(Hydroxy-chlorothalonil,CHT-OH) 的多克隆抗体.采用非竞争酶联免疫法(ELISA)以百菌清-卵清蛋白(OVA) 偶联物作为包被抗原,当其质量浓度为0.1 mg/L时,测得抗百菌清血清的效价约为1 : 1×104.据此建立了百菌清间接竞争ELISA检出方法,并用于蔬菜中百菌清及其代谢产物的残留分析.实验结果表明,该方法对百菌清的检出限(IC20) 为0.012 3 μg/L,回收率为87% ～92%;对其代谢产物的检出限(IC20)为0.019 5 μg/L,回收率为105% ～111%;总残留量的检测回收率为85% ～107%.对百菌清的结构类似物交叉反应率均小于0.01%.ELISA方法的测定结果与高效液相色谱法的测定结果有良好的一致性.建立的方法适合于蔬菜中百菌清和羟基百菌清总残留量的测定.