番茄溃疡病一步法快速超灵敏检测技术研究

摘要

对种子携带的番茄细菌性溃疡病菌（Clavibactermichiganensissubsp，michiganensis）进行简单抽提和纯化，不经过DNA提取而以病原菌为模板直接进行一步法PCR检测，对纯菌液Direct—PCR最低检出限为2600个细菌／mL，而Nested-PCR最低检出限可达到13个细菌／mL；对种子提取液，Direct-PCR不能检出，而Nested—PCR最低检出限可达到3×10^5个细菌／mL,一步法Nested-PCR可在12h内对番茄种子携带的番茄溃疡病菌进行准确的定性鉴定。并且方法方便快速，成本低，灵敏度高，适用于种子携带番茄溃疡病菌的快速鉴定。