番茄溃疡病一步法快速检测技术研究

摘要

对番茄细菌性溃疡病菌进行种子带菌的模拟检测试验。对用菌液处理过的种子进行简单抽提和纯化,不经过DNA提取而以抽提和纯化的病原菌为模板直接进行一步法PCR检测,对纯菌液D irect-PCR最低检出限为2 600个细菌/m l,而N ested-PCR最低检出限可达到13个细菌/m l;对种子提取液,D irect-PCR不能检出,而N ested-PCR最低检出限可达到3×105个细菌/m l。一步法N ested-PCR可在12 h内对番茄种子携带的番茄溃疡病菌进行准确的定性鉴定。并且方法方便快速,成本低,灵敏度高,适用于种子携带番茄溃疡病菌的快速鉴定。