E-64对绵羊卵母细胞体外成熟过程中caspase表达规律的影响

摘要

为了研究E-64对绵羊卵母细胞体外成熟过程中caspase表达的影响,从而探究E-64抑制卵母细胞凋亡的基本途径.本试验利用双夹心ELISA方法,研究体外成熟过程中绵羊卵母细胞内caspase-3,caspase-8以及caspase-9的蛋白表达水平及酶活水平的变化规律,以及成熟液中添加E-64对其产生的影响.结果表明:caspase-3、caspase-8和caspase-9的蛋白表达水平均呈先升高后降低的变化规律,caspase-3和caspase-9的活性与其蛋白表达的变化规律相一致,而caspase-8的活性则呈逐渐升高的变化规律;成熟液中添加E-64,对caspase-3、caspase-8和caspase-9的蛋白表达水平均无显著性(P＞0.05)影响,但可以降低caspase-8和caspase-9的酶活性(P＜0.05),而对caspase-3的酶活性无显著性影响(P＞0.05).表明E-64通过在酶活性水平上下调死亡受体途径中caspase-8的活性和线粒体途径中caspase-9的活性,从而降低了卵母细胞体外成熟过程中的细胞凋亡刺激.