高糖通过P27途径诱导胰岛β细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用及机制研究

摘要

目的:研究高糖通过P27途径诱导胰岛β细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用及机制.方法:培养胰岛INS-1细胞后分组,对照组用普通培养基处理、高糖组用含有25 mmol/L葡萄糖的高糖培养基处理,高糖+si-NC组用高糖培养基处理并转染阴性对照(NC)siRNA、高糖+si-P27组用高糖培养基处理并转染P27 siRNA.处理24 h后,采用MTS法检测细胞活力A490,TUNEL法检测凋亡率,流式细胞术检测细胞周期分布,western blot检测P27、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶8(caspase-8)、细胞周期蛋白(cyclinD1)的表达水平.结果:与对照组比较,高糖组A490、S期及G2/M期比例、cyclinD1表达水平均降低,凋亡率、G0/G1期、P27及caspase-8表达水平均增加(P0.05);与高糖组及高糖+si-NC组比较,高糖+si-P27组A490、S期及G2/M期比例、cyclinD1表达水平均增加,凋亡率、G0/G1期、P27及caspase-8表达水平均降低(P<0.05).结论:高糖诱导胰岛β细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用与激活P27途径有关.