lncRNA ASB16-AS1在结直肠癌组织中的表达及对结直肠癌细胞增殖的影响

摘要

cqvip:目的:探讨lncRNAASB16-AS1在结直肠癌(CRC)中的表达及其对CRC细胞增殖的影响。方法:采用逆转录定量PCR(qRT-PCR)检测26对CRC及其配对癌旁组织、4株CRC细胞(HT-29、SW-480、SW-620及LOVO)中lncRNAASB16-AS1的表达,选择2株lncRNAASB16-AS1表达最高的CRC转染ASB16-AS1干扰片段作为干扰组,实验设置对照组(不转染)及阴性对照组(转染阴性对照干扰片段),采用CCK-8法检测转染0、24、48、72及96h时细胞的增殖情况,qRT-PCR法检测转染48h时细胞miR-185-5p表达;将含有ASB16-AS1野生型序列或突变序列的质粒与miR-185-5pmimic或阴性对照mimic共转染至293T细胞,转染24h后采用双荧光素酶法检测各组细胞的荧光强度,观察lncRNAASB16-AS1对miR-185-5的调控作用。结果:qRT-PCR结果显示,lncRNAASB16-AS1在CRC组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),CRC细胞HT-29及LOVO中lncRNAASB16-AS1的表达水平显著高于SW-480及SW-620(P<0.01);与阴性对照组比较,转染ASB16-AS1干扰片段的HT-29和LOVO细胞中lncRNAASB16-AS1的表达水平显著降低(P<0.01);转染48h开始,干扰组HT-29和LOVO细胞的增殖水平显著低于阴性对照组(P<0.05);转染48h时,下调ASB16-AS1后细胞中miR-185-5p表达水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶结果显示,野生型ASB16-AS1和miR-185-5pmimic共转染,显著降低293T细胞中双荧光素酶的活性(P<0.05)。结论:CRC的发生发展的机制与lncRNAASB16-AS1上调有关。