独活寄生汤对IL-1β诱导软骨细胞TNF-α分泌与PI3K、AKT表达的影响

摘要

[目的]探讨独活寄生汤对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌与磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路中PI3K、AKT蛋白与mRNA表达的影响.[方法]将软骨细胞分为空白对照组,模型对照组,中药低、中、高剂量组和阳性对照组.模型对照组,中药低、中、高剂量组和阳性对照组软骨细胞用IL-1β 10 ng·mL-1诱导24 h后,分别加入空白血清,独活寄生汤低、中、高剂量含药血清,鹿瓜多肽注射液含药血清培养12h.空白对照组不经IL-1β诱导,加入空白血清.应用细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定软骨细胞活力的变化,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测软细胞培养基中TNF-α含量,蛋白免疫印迹(Western Blot)、荧光实时聚合酶链反应(PCR)法分别检测软骨细胞PI3K、AKT蛋白、mRNA表达水平.[结果]与空白对照组比较,模型对照组IL-1β诱导的软骨细胞活力明显下降(P＜0.01),TNF-α的含量明显增高(P＜ 0.01),PI3K、AKT蛋白及mRAN表达水平明显降低(P＜0.01);与模型对照组比较,中药中剂量组和阳性对照组软骨细胞活力明显升高(JP＜0.01),TNF-α含量明显降低(P＜0.01),PI3K、AKT蛋白与mRAN表达水平明显升高(P＜0.01),且2个治疗组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]独活寄生汤对于IL-1β诱导的软骨细胞损伤有治疗作用,其作用机制可能与调控炎症因子TNF-α的分泌及PI3K/AKT信号通路中P13K、AKT的表达有关.