几种固定化苯丙氨酸解氨酶方法的比较

摘要

目的 :对不同方法固定化苯丙氨酸解氨酶 (PAL)的偶联率或包被率以及固定化对PAL活性和稳定性的影响进行比较 ,以期得到较为方便、有效的固定化PAL。方法 :(1)采用不同T∶C比例的聚丙烯酰胺凝胶 (PAG)包埋PAL ;(2 )分别用戊二醛和碘化 1 [环己基 3 (3 二甲氨丙基 ) ]碳二亚胺 (CDC)将PAL固定于Bio GelP 30 0 ;(3)分别用超声法、脱水再加水法、复乳法将PAL包被于三种脂类组成不同的质脂体 ;(4)对诱变选育出的含PAL活性酵母细胞进行丙酮处理。结论 :(1)包埋法采用T∶C比为 8∶30时固定化酶活性明显高于T∶C比为 8∶19,两者活性保留率分别为 50 .6 %和 17.1% ;(2 )载体偶联法以戊二醛将PAL固定于Bio GelP30 0优于用DCD固定化的酶 ,两者活性保留率分别为 2 7.2 %和 13.9% ;(3)质脂体包被中以脱水再加水法对酶活性影响较小 ,脂类组成以磷脂酰胆碱∶胆固醇∶磷脂酰丝氨酸比值 7∶2∶1最好 ;(4)固定化PAL活性酵母细胞能较好地抵抗人工肠液中胰蛋白酶的水解作用 。