大鼠肝脏细胞及中国仓鼠肾脏成纤维细胞转染条件的优化

摘要

目的:应用携带有报告基因-βGal的质粒对于使用L ipofectam ine 2000转染大鼠肝脏细胞及中国仓鼠肾脏成纤维细胞条件进行优化。方法:在96孔板上按不同比例混合L ipofectam ine 2000和质粒DNA后转染大鼠肝脏细胞及中国仓鼠肾脏成纤维细胞,成功转染的细胞因可表达β-Gal可分解底物X-gal在染液的存在下可使细胞呈蓝色,故计算蓝色细胞的比例即可了解转染的效率。应用方差分析的方法进行统计分析。结果:对于BHK细胞,当DNA与L ipofectam ine 2000的比例为0.27∶0.8(μg∶μL)时转染效率最高,为(43.2±9.3)%;对于BRL细胞,DNA与L ipofectam ine 2000的比例为0.10∶0.3(μg∶μL)时转染效率最高,可达(5.7±1.3)%。结论:L ipofectam ine 2000可有效转染哺乳动物细胞,不同细胞有不同的最佳转染条件。