miR-203靶向ΔNp63对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭、凋亡和干细胞特性的影响

摘要

目的:研究微小RNA-203(miR-203)靶向ΔNp63对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、侵袭、凋亡和干细胞特性的影响.方法:TCGA数据库分析miR-203和ΔNp63在头颈鳞状细胞癌及其邻近正常组织中的表达.采用RT-qPCR法检测OSCC细胞系(Tca8113、CAL-27、SCC-9)和正常人口腔角质形成细胞(NHOK)中miR-203和ΔNp63 mRNA表达.将miR-NC、miR-203 mimic、pcDNA、pcDNA-ΔNp63分别转染及miR-203 mimic和pcDNA-ΔNp63共转染CAL-27细胞.Western blotting法检测ΔNp63、Bax、Bcl-2、Ki67、MMP-2、E-cadherin、N-cadherin、Lin28B、SOX2和OCT4蛋白表达.荧光素酶报告实验分析miR-203和ΔNp63的靶向关系.CCK8、Transwell、流式细胞术分别检测细胞活力、侵袭能力、凋亡和ALDH阳性细胞数目.构建裸鼠移植瘤模型,检测miR-203对体内肿瘤的作用.结果:miR-203在头颈鳞状细胞癌组织和OSCC细胞中表达下调,ΔNp63表达上调(P<0.05).miR-203靶向负调控ΔNp63的表达.miR-203组ΔNp63、Ki67、MMP-2、N-cadherin、Bcl-2、Lin28B、SOX2和OCT4表达及CAL-27细胞活力降低,侵袭细胞数和ALDH阳性细胞数明显减少,细胞凋亡率及Bax和E-cadherin表达升高(均P<0.05).pcDNA-ΔNp63组结果与之相反,且过表达miR-203可逆转ΔNp63对CAL-27细胞活力、侵袭和干细胞样特性的促进作用(P<0.05).miR-203能抑制口腔鳞癌细胞CAL-27裸鼠移植瘤的生长,并下调肿瘤组织ΔNp63表达.结论:miR-203通过抑制ΔNp63表达在OSCC细胞中发挥抑癌作用.