TNF-α和IFN对骨肉瘤细胞的作用研究

摘要

目的:探讨肿瘤环死因子(TNF)对骨肉瘤细胞(Os732细胞株)的细胞毒作用,为骨恶性肿瘤临床治疗提供依据.方法:将Os732细胞株培养于1640培养液中,放置于37℃、5%CO2培养箱中,根据细胞的生长特性及倍增时间,待细胞生长到一定的数量进行传代,传代后的细胞足以施行实验后收集起来,调整为5×104个/ml细胞悬液备用.分别将TNF、干扰素(IFN)、TNF+IFN各调整为不同的浓度梯度.取细胞培养板每孔加入150μl细胞悬液.分别加入不同浓度的细胞悬液50 μl,每浓度重复4～6孔,分别于24、48、72、96 h各取一培养板加入浓度为5 g/IMTT液25 μl设置空白对照,培养4 h后,倒弃培养液每孔加入200μl二甲基亚砜,于微型震荡器上震荡完全溶解结晶后放入免疫酶联测定仪测各值.结果:TNF、IFN、TNF+IFN各试验组均对骨肉瘤细胞有细胞毒作用,其中TNF浓度从500～4 000 U/ml其细胞杀伤力由13%～27.63%,IFN浓度从500～4 000U/ml其细胞杀伤力从13.95%～33.24%,而联合应用的TNF+IFN浓度由250+250 U/ml至2 000+2 000 U/ml其杀伤力从20.61%～59.61%,各浓度梯度越往上细胞杀伤力越高,联合应用时,半量的剂量浓度即达到同一浓度全量的效果.结论:肿瘤坏死因子对骨肉瘤细胞有较明显的杀伤作用,联合干扰素,可以通过多种途径进一步提高对骨肉瘤细胞的杀伤力.