体外培养心脏成纤维细胞增殖的检测方法

摘要

目的在培养的心脏成纤维细胞模型上建立检测增殖的方法.方法 (1)差速贴壁分离法培养乳鼠心脏成纤维细胞,用光镜、电镜及免疫细胞化学染色进行鉴定.(2)同步测定心脏成纤维细胞在不同浓度胎牛血清作用下BrdU掺入和WST-1代谢活性.结果 (1)培养的细胞经形态学观察和波形蛋白SP染色,鉴定为成纤维细胞.(2)在0,1%,2.5%,5%和10%的胎牛血清作用下,心脏成纤维细胞BrdU,WST-1的OD值分别是0.186±0.025,0.300±0.073;0.466±0.049,0.531±0.072;0.761±0.039,0.716±0.064;0.834±0.048,0.833±0.073和0.905±0.064,0.935±0.053(P<0.01).结论 (1)WST-1可在活的心脏成纤维细胞代谢,WST-1法适用于该细胞的增殖.(2)BrdU、WST-1 ELISA可同步测定心脏成纤维细胞的DNA合成及其代谢活性,是检测细胞增殖的新方法.