小麦成熟胚再生体系及基因枪转化的初步研究

摘要

以小麦品种晋麦2148的成熟胚为外植体,消毒后用解剖刀刨碎,接种于MS+VB5+11. 2 g·L-1葡萄糖+2 mg·L-1 2,4-D+8 g·L-1琼脂糖的培养基中诱导愈伤组织,将诱导3周的成熟胚愈伤组织接种到胚状体成熟培养基(MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+0.2mg·L-1 IAA+8 g·L-1琼脂糖)中培养4-8周,然后转接到再生培养基(1/2MS+VB5+30 g·L-1蔗糖+8 g·L-1琼脂糖)中进行再生成苗.接种1200块成熟胚,得到1123块愈伤组织,最终形成258株再生苗,再生率为21. 5%.在建立了再生体系的基础上,用基因枪介导法将GUS基因导入成熟胚愈伤组织,X-gluc染色表明,GUS基因已经在小麦成熟胚愈伤组织中表达.将100块愈伤组织用X-gluc染色,29块愈伤组织出现肉眼可见的蓝色小点.