电转化法制备高转化效率的E.coli感受态细胞研究

摘要

为了制备高转化效率的E.coli TG1和E.coli DH5α感受态细胞,采用电转化方法探索E.coli生长对数期的不同生长阶段、质粒DNA含量、电场强度对E.coli转化效率的影响.研究结果表明:40 μL菌液中加1.0 ng pUC19 DNA,用间隙0.2 am电击杯时转化效率最高,E.coli TG1有1个电转化效率峰值,即A600为0.665时,转化效率达1.7×109cfu/μg pUC19 DNA;E.coli DH5α有2个转化效率峰值,即A600为0.443和0.810时,转化效率均为3.0×109cfu/μg pUC19DNA.研究结果表明,在相同情况下E.coli DH5α的转化效率高于E.coliTG1,利用本实验确定的参数可制备出高转化效率的电转化感受态细胞.