电转化

摘要： 为进一步提高角鲨烯产量,以海洋产角鲨烯类酵母(Pseudozyma sp.)SD301为出发菌株,采用碳离子(;C;)束诱变技术选育高产角鲨烯的突变菌株,并对突变菌株的电转化条件进行优化。利用100μmol·L^(-1)过氧化氢(H;O;)作为筛选压力,在12C6+束辐照剂量为120 Gy时,获得了比出发菌株具有更高角鲨烯产量的突变株PS120,该突变株在培养3 d后,角鲨烯产量达到1.33 g·L^(-1),角鲨烯质量(细胞质量)达到41.31 mg·g^(-1)。利用绿色荧光蛋白EGFP作为表征标记,对PS120进行电转化条件优化,酶切、电泳和测序研究结果表明900 V电压条件下可成功将编码EGFP的基因转入到PS120细胞中,通过激光共聚焦显微镜进一步证实EGFP蛋白在该细胞中高水平表达。

摘要： 电击转化是一种快速有效的转化方法,可广泛应用于微生物遗传操作。为了建立高效的适用于三孢布拉霉的遗传转化技术,该研究基于电转化策略对其原生质体转化进行了优化。首先对制备原生质体的酶解时间、电压大小与电脉冲时间、缓冲液种类、核酸浓度及再生培养时间等进行了单因素优化。然后通过正交试验分析,结果表明在电压为0.4 kV,电脉冲时间为2 ms条件下进行电击,之后再生培养3 h的转化效率最高,达到35.1 CFU/μg。随后以电转化重组了基因btwc-1c的表达载体为例,其转化效率约为30 CFU/μg。荧光定量PCR分析和表型分析结果表明转化菌中btwc-1 c的表达水平和β-胡萝卜素的合成水平相对野生菌分别提升了2.5倍和2.1倍,该结果表明该研究建立的电转化三孢布拉霉原生质的方法能够高效实现受体菌对外源载体的摄取,为研究三孢布拉霉中关键调控基因的功能奠定了良好的基础。

摘要： 目的 对DNA电转化条件进行优化,以达到高的转化效率.方法 测定不同生长阶段的大肠杆菌TG1、不同电压、不同外源基因(噬菌体质粒pCANTAB5e与驼源VHH片段的连接产物)质量、T4 DNA连接酶去除前后及转化孵育后不同培养温度等条件下的电转化效率,寻找最适电转化条件.结果 当大肠杆菌TG1处于生长对数期(OD600为0.4左右)时制备电感受态细胞,取用乙醇沉淀法去除T4 DNA连接酶后的0.7μg连接产物,在电压2.3 kV、电容25μF、电阻200Ω的条件下,采用0.2 cm的电击杯进行电转化,将获得高的转化效率,达7.9×107 CFU/μg DNA,而转化后的培养温度(30°C和37°C)对电转化效率并没有明显影响.结论 经优化电转化条件后得到了高的电转化效率,为构建抗体库奠定基础.

摘要： 唾液乳杆菌对人体健康有重要意义,作为一株可食用益生菌有着极大的应用潜力,但较低的电转化效率限制了唾液乳杆菌的遗传操作.本研究从细菌培养状态、甘氨酸浓度、蔗糖浓度、电压和复苏时间等因素着手对唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius AR612)的电转化条件进行优化.结果表明,唾液乳杆菌AR612的最佳电转化参数为:OD600为0.1,甘氨酸浓度10 g/L,蔗糖浓度0.3mol/L,电压7.5 kV/cm,复苏时间3 h.在优化条件下,电转化效率最高可达1.16×108 CFU/μgDNA.与优化前(2.33×105 CFU/μg DNA)相比,转化效率提升了3个数量级.本文通过电转化参数的优化,成功地提高了唾液乳杆菌菌株AR612的转化效率,为进一步解析唾液乳杆菌功能基因及益生机制奠定了基础.

摘要： 为了建立一种高效快捷的大肠杆菌(Escherichia coli)电转化方案,采用类似密度梯度离心的方法,使用角转子离心机达到快速除盐的目的 .研究发现,以20％甘油(V/V)/1.5％甘露醇(m/V)溶液作为梯度介质,采用菌悬液与梯度介质比例为1:5(V/V)时形成的密度梯度可有效地进行离心除盐,离心后的细胞以20％甘油(V/V)/1.5％甘露醇(m/V)溶液重悬,随后在电场强度为15 kV/cm的条件下进行电转化能得到较高的转化效率,而在室温条件下进行电转化试验不能提高转化效率.本研究仅通过2次离心,电转化效率可达到4.2×109 CFU/μg DNA,大大简化了试验流程.

摘要： [背景]嗜热链球菌AR333是本实验室从发酵乳中筛选出的一株高产活性胞外多糖乳酸菌.[目的]建立嗜热链球菌AR333高效电转化体系.[方法]通过单因素试验和Box-Behnken响应面法优化电转化条件.[结果]嗜热链球菌AR333最优电转化条件为甘氨酸浓度8.3g/L,OD600为0.8,10％甘油(体积比)和0.5 mol/L蔗糖的电转缓冲液,pIB 184质粒80 ng,电场强度14 kV/cm,0.4 mol/L山梨醇、2 rnmol/L CaCl2和20 mmol/L MgCl2的LM17复苏培养基,复苏时间5h.[结论]在最优电转化条件下,嗜热链球菌AR333电转化效率达到3.68×105 CFU/μg-DNA,比优化前提高了14倍,实现了嗜热链球菌AR333的高效遗传转化,为其功能解析和基因工程改造奠定基础.

摘要： 肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)作为革兰氏阳性菌,遗传转化难度大是限制其遗传操作的主要因素之一.通过优化菌体生长状态、电击缓冲液、复苏培养基组分等条件,分析了各因素对S.carnosus TM300电转化效率的影响.研究表明:S.carnosus TM300在B2生长培养基中生长到A578=0.6时收集菌体,使用GS电击缓冲液洗涤菌体制备感受态细胞,在电压2450 V、间距2 mm电转杯条件下进行电转化,电击后立即加入LBM复苏培养基,37°C、180 r/min摇床复苏培养4 h,可以获得的最佳电转化效率为5.95×103μg-1.

摘要： 本文介绍了利用Mu转座重组技术对能抑制病原真菌生长的地衣芽孢杆菌菌株进行的功能基因组分析.Mu转座复合物是由人工Mu转座子(携带一个卡那霉素抗性基因),在体外与四聚体MuA转座酶形成,然后,电转化地衣芽孢杆菌的受体细胞,引起插入位点基因的失活和相应表型的改变,经重组抗性和表型筛选,可以进一步探索未知的芽孢杆菌抑真菌肽相关基因.用含Glycine的M9-YE液体培养基培养细胞至对数早期(OD600=0.5左右),制备感受态细胞,电击电压为1.8kV,在国际上首次成功地将Mu转座复合物电转化入地衣芽孢杆菌中,转化效率为3.1×102CFU/μgDNA,同时得到芽孢杆菌抑真菌作用变小的转化子.

摘要： 芽孢杆菌在高渗透压的条件下,易转化为感受态细胞.甘氨酸的加入有助电击时保护细胞膜.本文通过甘露醇山梨醇制造高渗透压,同时调整甘氨酸加入时期、细胞生长程度及电转电压的调整,建立了感受态细胞对质粒pWB980的高效电转化方法.当OD600为0.8时加入甘氨酸,培养至OD600为1.6时停止生长、转化时电压为2100V的时候,可以得到536个转化子,经鉴定均为阳性克隆子.而常规电转化的最高仅为20个转化子.为以解淀粉芽孢杆菌为宿主进行高效电转化提供了模型,也为建立适合工业应用的分泌型表达载体的构建打下了一定基础.

摘要： 本发明公开了一种非均匀吸收率固态热机光‑电转换或热‑电转换装置和方法，该装置包括透镜、旋转遮光板、固态热机、桥式整流电路以及可充电电容；固态热机为由导电膜、热释电膜和导电振动膜依次粘连复合而成的工质，导电膜局部表面覆盖一层着色涂料；光波经透镜后产生的聚焦光束经旋转遮光板的调制形成光脉冲，光脉冲照射在导电层表面周期性加热固态热机，在光波照射下的固态热机的导电层上形成高能量密度空间和低能密度空间，高、低能量密度空间相接触的位置形成突变的热梯度，产生应力突变强化了光能或热能向机械能转化的效应，促进固态热机发生热释电效应，输出交流电经桥式整流电路后向可充电电容供电。热电转换效果好，经济成本低。

摘要： 本发明公开了一种非均匀吸收率固态热机光‑电转换或热‑电转换装置和方法，该装置包括透镜、旋转遮光板、固态热机、桥式整流电路以及可充电电容；固态热机为由导电膜、热释电膜和导电振动膜依次粘连复合而成的工质，导电膜局部表面覆盖一层着色涂料；光波经透镜后产生的聚焦光束经旋转遮光板的调制形成光脉冲，光脉冲照射在导电层表面周期性加热固态热机，在光波照射下的固态热机的导电层上形成高能量密度空间和低能密度空间，高、低能量密度空间相接触的位置形成突变的热梯度，产生应力突变强化了光能或热能向机械能转化的效应，促进固态热机发生热释电效应，输出交流电经桥式整流电路后向可充电电容供电。热电转换效果好，经济成本低。

摘要： 公开了一种用于光电转化器件的密封剂，在生产光电转化器的过程中，它能容易地粘结上部和下部传导性承载体，同时形成具有优良的粘合强度、耐湿可靠度、柔性和类似特性的密封部分。具体地说，含(a)环氧树脂，(b)热固化剂，(c)环氧(甲基)丙烯酸酯，和(d)光聚合引发剂和另外视需要的(e)填料、(f)硅烷偶联剂和(g)离子捕获剂的光固化和热固化的树脂组合物用作用于光电转化器的密封剂。

摘要： 本发明提供了一种光电化学制氢反应器，其包括：密封的反应容器，用于容纳电解质溶液；至少一部分由质子交换膜构成的隔板，其位于反应容器内并且用于将反应容器分成彼此不透气的用于生成氧气的第一反应室和用于生成氢气的第二反应室；参比电极，其位于第一反应室内；其特征在于，所述反应器还包括：与第一反应室相连的第一电解质溶液注入口；与第二反应室相连的第二电解质溶液注入口；位于第一反应室中的至少一个第一固定装置，用于固定阳极；位于第二反应室中的至少一个第二固定装置，用于固定阴极；与第一反应室连接的第一储气装置；和与第二反应室连接的第二储气装置。还提供了光电化学制氢系统和气体收集方法、光氢能转化效率测量系统、光氢能/光电转化效率测量方法。

摘要： 由于太阳能和风能的快速增长突显了储水发电来实现电网的调峰调频调相的必要性，为了维护电网的安全和向客户提供高品质的电能，储水发电通常是用电能将水提升到高处再利用水的重力势能来发电的过程。本发明克服了太阳能、风能发电的间歇性、石化燃料燃烧的热电转换行成电能的波动，可直接将太阳能、风能、其他石化燃料的热能，转化成水的重力势能来发电，不仅减轻了电网的调峰要求，还改进了热电转化的蒸汽机的工作物质。由于水的比热容较大和汽化热较多，严重地阻碍了传统的热电转化效率，本发明用加热氨水代替加热水来产生氨气用氨气代替水蒸气推动推动蒸汽机发电，大大提高了热电转化的效率也降低了能耗。

摘要： 公开了一种用于光电转化器件的密封剂，在生产光电转化器的过程中，它能容易地粘结上部和下部传导性承载体，同时形成具有优良的粘合强度、耐湿可靠度、柔性和类似特性的密封部分。具体地说，含(a)环氧树脂，(b)热固化剂，(c)环氧(甲基)丙烯酸酯，和(d)光聚合引发剂和另外视需要的(e)填料、(f)硅烷偶联剂和(g)离子捕获剂的光固化和热固化的树脂组合物用作用于光电转化器的密封剂。

摘要： 本发明公开了一种基于太阳能光热转化和光电转化的集热储热装置，包括太阳能集热器、太阳能光伏板、储热器、泵送装置、热量传输导管和导热线圈，所述太阳能集热器通过所述热量传输导管与所述泵送装置相连，形成光热转化回路；所述泵送装置设置于所述储热器内部，所述储热器的壁面为双层结构，所述导热线圈设于所述储热器底部，与所述蓄电池连接，所述蓄电池与太阳能光伏板相连，形成光电转化回路；利用所述太阳能集热器高效率的光热转化实现将太阳能转化为热能并储存于所述储热器中。由所述热量传输导管在储热器内部实现热交换，在螺旋传输导管的合理螺旋角下利用导热介质自重实现液体流动换热，可减少泵送装置的能量消耗。利用涡流加热原理对储热器进行加热，增加了热效率，加速了储热材料温度的提升。

摘要： 本发明涉及一种电转化感受态细胞的制备方法，首先将大肠杆菌接种于1mL LB液体培养基，振荡培养过夜后接种到100mL2×YT液体培养基，振荡培养至OD600值为0.4‑0.5，得到菌液；接着转移至预冷的50mL离心管中，冰上静置后离心，弃上清，回收菌体；加入50mL预冷1mM HEPES，重悬菌体，离心，弃上清，回收菌体，重复该步骤一次；往每个弃上清后的离心管中加入5mL预冷的含有10％甘油的1mM HEPES重悬菌体，离心，弃上清,接着加入300μL预冷的、含有10％甘油的无菌水重悬菌体，即得。本发明方法操作简单，转化效率高，可重复性高，转化效率大于10

摘要： 本发明涉及一种热离子转换器的热‑电转化方法，S1通过原子层沉积技术在p

摘要： 本发明提供了一种光电化学制氢反应器，其包括：密封的反应容器，用于容纳电解质溶液；至少一部分由质子交换膜构成的隔板，其位于反应容器内并且用于将反应容器分成彼此不透气的用于生成氧气的第一反应室和用于生成氢气的第二反应室；参比电极，其位于第一反应室内；其特征在于，所述反应器还包括：与第一反应室相连的第一电解质溶液注入口；与第二反应室相连的第二电解质溶液注入口；位于第一反应室中的至少一个第一固定装置，用于固定阳极；位于第二反应室中的至少一个第二固定装置，用于固定阴极；与第一反应室连接的第一储气装置；和与第二反应室连接的第二储气装置。还提供了光电化学制氢系统和气体收集方法、光氢能转化效率测量系统、光氢能/光电转化效率测量方法。