干燥型荧光PCR试剂盒检测食源性致病菌研究

摘要

目的:研究干燥型荧光PCR试剂盒检测副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157∶H7和单增李斯特菌3种食源性致病菌的灵敏度、特异性和检测人工污染样品情况.方法:目标菌和非目标菌接种至血平板,36℃培养过夜,目标菌比浊至0.5 McF(麦氏单位),10倍连续稀释后提取DNA,进行灵敏度研究;非目标菌直接提取DNA后检测,进行特异性研究;用高、中、低3个浓度目标菌液人工污染食品样品,按国标方法培养后用干燥型荧光PCR试剂盒检测.结果:副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157∶H7和单增李斯特菌的最低检测浓度分别为140、380和7900 CFU/mL.3种目标菌人工污染食品样品的最低检测浓度分别为1.2 CFU/25 g、5.1CFU/25 g、10 CFU/25 g.每种试剂盒仅对目标菌株的检测结果:呈阳性,非目标菌株均呈阴性.结论:新型干燥型荧光PCR检测试剂盒具有较好的灵敏度和良好的特异性,适用于食品中副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157∶H7和单增李斯特菌的检测.