食源性致病菌快速检测试剂盒的研制

摘要

目的：研制一种快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特菌的三重PCR试剂盒。方法：根据沙门氏菌的invA基因、单增李斯特菌溶血素hlyA基因和金黄色葡萄球菌耐热核酸酶Nuc基因序列作为目的基因片段金黄色葡萄球菌、沙门菌和单核细胞增生李斯特菌的特异性抗原基因序列，分别设计一对引物，优化各种工作条件，建立一种多重PCR诊断试剂盒。结果：本试剂盒特异性好，敏感性高，沙门氏菌检出极限为4.7 cfu/mL，单核细胞增生李斯特菌检出极限可达17 cfu/mL，金黄色葡萄球菌检出极限为4.5 cfu/mL。检测时间只需五小时。结论：建立的方法在理论和实际应用上都有优越性，且一次可检测出三种病原菌，可用于临床诊断。