人脐血树突状细胞体外无血清培养

摘要

树突状细胞(dendritic cell，DC)作为体内功能最强的抗原递呈细胞，已试用于肿瘤的免疫治疗，但多数实验室培养DC的体系中包含血清，使其临床应用受到限制。本研究以人脐血为来源，建立了无血清培养DC体系，以期将来用于临床。首先，用rhGM-CSF加rhTNF-α进行有血清液体悬浮培养，14天后，从(1±0．5)×104／m1CD34+细胞或(5±2)×105／ml单个核细胞中，总细胞数扩增5倍。DC分别占(25±5)％和(17±5)％。第二，以无血清培养基代替有血清培养基，培养21天，(2±1)×106／ml单个核细胞没有数量的扩增，DC占(7±2)％。最后，对上述培养体系，在第5天(有血清培养基)或第12天(无血清培养基)后加入rhIL-4，DC产率及细胞总数均未增加。本研究结论：①根据液体悬浮培养中观察到粒、巨噬细胞和DC的混合集落及DC小丛，证实DC与粒、巨噬细胞有共同祖先，均来源于CD34+造血干／祖细胞；②脐血单个核细胞虽较CD34+细胞产生DC的比率稍低，但分离方便，花费少；③无血清体系的培养效果不如有血清体系，培养所需时间也长，细胞产率也低，有待进一步完善；④未证实rhIL-4能增加DC产率。