利用反向 PCR 鉴定沼泽红假单胞菌中野生质粒

摘要

为准确研究沼泽红假单胞酋的野生质粒及其携带的基因信忠,在常规碱裂解法基础上,对沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas palustris ASl.2352 中野生质粒提取方法进行了优化,优化方法具有易操作、耗时少、纯度高等特点,所得质粒DNA纯度和质量均满足进一步分子操作的需要.同时,利用反向PCR技术鉴定该野生质粒,并结合生物信忠学方法对其进行分析,比传统的质粒丢失法验证和考察质粒更为省时、可靠和直观.证明菌株携带4个野生质粒,其中2.3 kb 的质粒序列与Escherichia coli pECl57 Rom-like protein gene有97.8%的同源性,推测1885～1887 碱基为复制起点.