逆转录病毒介导人肿瘤坏死因子-α基因抑制胆管癌细胞的生长

摘要

[目的]研究逆转录病毒介导的人肿瘤坏死因子α(TNFα)基因转染对人胆管癌细胞生长的抑制作用.[方法]构建逆转录病毒-TNFα(pLNCX-TNFα)复合体,转染人胆管癌细胞得到稳定表达,通过聚合酶链式反应(PCR)、流式细胞仪(FCM)、免疫组织化学等方法检测基因表达、细胞生长增殖和细胞凋亡等情况.[结果]pLNCX-TNFα基因转染人胆管癌细胞后,pLNCX空质粒转染组、pLNCX-TNFα基因转染组的细胞均能扩增出708 bp的基因片断,而未转染组则无;pLNCX-TNFα基因转染组的细胞克隆抑制率为64%,与对照组和pLNCX空质粒转染组相比,差异性非常显著(P＜0.01);转染的人胆管癌细胞G1期比例从29.07 % 增加到 54.24 %,G2-M期和S期比例分别从52.03 %下降到2.02 %,18.32 %下降到10.34 %;凋亡细胞数从5.83 % 增加到34.76%.[结论]TNFα基因通过诱导胆管癌细胞发生凋亡并导致其发生G1期阻滞抑制胆管癌细胞的生长.