自噬和凋亡联合在ALA-PDT诱导C6胶质瘤细胞死亡中的作用机制

摘要

目的 探讨自噬和凋亡在氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)诱导大鼠C6胶质瘤细胞死亡中的联合作用机制.方法 通过MDC染色和电镜等观察ALA-PDT后的自噬现象,检测Caspase-3活化以探讨自噬与凋亡机制在ALA-PDT诱导C6胶质瘤细胞死亡中的作用机制.结果 ALA-PDT后3h,MDC染色C6胶质瘤细胞内可见明显的点状荧光颗粒,且随时间逐渐明显增多,24h时荧光颗粒变弱.透射电镜观察到ALA-PDT后3h时,胞浆中即出现大量独立双层膜结构,12 h时自噬体及其独立双层膜结构相对变少,24h时观察到典型的凋亡形态,同时仍可见较多的自噬体和独立双层膜结构及自噬溶酶体的出现.Western-blot结果提示,ALA-PDT后1hC6胶质瘤细胞内少量Caspase-3活化,12 h时Caspase-3酶原表达最高;Ac-DEVD-CHO干预后Caspase-3酶原活化明显减弱.结论 凋亡机制有助于ALA-PDT诱导C6胶质瘤细胞的死亡,而自噬的激活延迟ALA-PDT诱导的细胞凋亡.