125I放射性粒子持续照射抑制HepG2肝癌细胞增殖的作用机制

摘要

目的 探讨125I放射性粒子持续照射抑制HepG2人肝癌细胞增殖的作用及诱导凋亡的可能潜在机制.方法 以HepG2 人肝癌细胞为研究对象,用125I放射性粒子体外照射装置进行持续照射.初始剂量率为5.32 cGy/h,分别给予0、2及4 Gy照射.通过光镜及Hoechst33258染色观察形态学改变;采用克隆形成实验计算克隆形成率;利用划痕实验检测细胞迁移能力的变化;用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.用Western Blot法检测凋亡相关蛋白表达.2组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 经0、2、4 Gy 125I放射性粒子照射HepG2细胞后,用光学显微镜发现4Gy组细胞密度减少,球形游离死亡细胞数目增多;经Hoechst33258染色后发现4 Gy组可见核固缩、碎裂及边集等凋亡细胞的典型特征.克隆形成实验发现对照组、2Gy组和4Gy组的克隆形成数分别为(120.00 ±3.61)％、(112.00±2.00)％、(45.00 ±3.61)％,3组比较差异有统计学意义(F=508.90,P＜0.001).划痕愈合实验示,对照组、2Gy组和4 Gy组的细胞迁移率分别为(21.24±4.36)％、(19.93±3.37)％和(11.42±0.65)％,3组细胞迁移率比较差异有统计学意义(F=8.29,P＜0.001).流式凋亡检测示,对照组、2Gy组及4Gy组的HepG2细胞凋亡率分别为(4.33±0.67)％、(6.90±1.31)％和(17.03±1.43)％,3组比较差异有统计学意义(F =110.01,P＜0.001).Western Blot检测结果示,125I粒子照射组显著抑制肿瘤增殖相关蛋白PCNA、凋亡蛋白Survivin及Bcl-2的表达,增加促凋亡蛋白Bak、Bax的表达.结论 125I放射性粒子通过促进HepG2细胞凋亡,抑制增殖及迁移,从而抑制HepG2细胞的生长,其可能机制与凋亡相关蛋白表达抑制等因素相关.