穿心莲内酯通过诱导线粒体自噬对实验性帕金森病小鼠改善作用研究

摘要

目的探讨穿心莲内酯(AG)对实验性帕金森病小鼠的改善作用及其机制是否与诱导线粒体自噬有关。方法C57BL/6雄性小鼠,10~12周龄,体重22~25g,均购于辽宁成大生物股份有限公司。共将40只小鼠按照实验目的分为5组:对照组、模型组、AG低剂量组、AG中剂量组和AG高剂量组,各8只。除对照组外,模型组、AG低剂量组、AG中剂量组和AG高剂量组均通过腹腔注射MPTP诱导C57BL/6小鼠发生实验性帕金森病。AG低、中、高剂量组依次分别给予2.5、5.0、10.0mg·kg^(-1)·d^(-1)的AG灌胃,对照组和模型组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃,每日1次,连续14d。测试各组小鼠的神经行为学功能;实时荧光定量PCR检测各组小鼠脑SNpc区域IL-1β、NLRP3的mRNA表达;蛋白质免疫印迹检测其parkin、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、p62的蛋白表达情况;免疫组织化学检测其parkin表达情况。结果与对照组相比,模型组小鼠神经行为学受损,表现为爬杆时间延长和转棒停留时间下降,其脑SNpc区域IL-1β、NLRP3的mRNA表达水平显著升高,parkin、LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平显著降低,p62蛋白表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,AG中、高剂量组可显著恢复小鼠神经行为学功能,脑SNpc区域IL-1β、NLRP3的mRNA水平显著降低,parkin、LC3-Ⅱ/Ⅰ表达显著增加,p62蛋白的表达显著减少,差异均有统计学意义(P<0.05),并均呈剂量依赖性。结论AG可显著改善实验性帕金森病小鼠神经行为学功能,其机制主要通过诱导脑线粒体自噬并减轻神经炎症实现,且在本研究设置剂量范围内其作用效果呈剂量依赖性。