莪术提取物榄香烯调控RAF/MEK/ERK信号通路对垂体瘤大鼠细胞生长、分化的影响

摘要

目的 分析莪术提取物榄香烯调控RAF/MEK/ERK信号通路对垂体瘤大鼠细胞生长、分化的影响.方法 2019年3月至2019年12月收集购于中国科学院上海细胞生物研究所的大鼠GH3垂体瘤细胞株,采用MTT法、流式细胞仪、蛋白质免疫印迹等方法,分别检测不同质量浓度(0、20、40、60、80μg/mL)的榄香烯处理对大鼠GH3垂体瘤细胞增殖抑制作用、细胞凋亡及其对Raf-1、ERK、Bcl-2、Bax蛋白质表达的影响.结果 经20、40、60、80μg/mL质量浓度的榄香烯处理12 h后,GH3细胞的活性[(80.02±8.14)％、(60.01±6.14)％、(41.06±4.14)％、(39.14±3.15)％]依次明显降低,呈剂量依赖性(F=32.045,P<0.05).60μg/mL质量浓度的榄香烯处理12、24、36、48 h后,GH3细胞的相对活性依次明显降低,呈时间依赖性(F=42.015,P<0.05).榄香烯呈时间依赖性诱导GH3细胞凋亡,随作用时间增加,凋亡诱导作用增强(F=165.028,P<0.05).经20、40、60、80μg/mL质量浓度的榄香烯处理GH3细胞2 h后,磷酸化的ERK和Raf-1蛋白表达渐进性降低(F=265.021,P<0.05),但非磷酸化的ERK和Raf-1蛋白表达差异无统计学意义(F=3.021,P>0.05).榄香烯下调GH3细胞中Bcl-2表达(F=128.27,P<0.05),但Bax表达无显著差异(F=2.328,P>0.05),Bax/Bcl-2值增加(F=106.80,P<0.05).结论 榄香烯可抑制大鼠GH3垂体瘤细胞的体外增殖,抑制RAF/MEK/ERK信号通路,下调下游癌基因Bcl-2表达,增加Bax/Bcl-2值,诱导细胞凋亡,且其作用呈剂量和时间依赖性.