miR-214-3p通过靶向PTEN抑制骨肉瘤U2OS细胞凋亡的研究

摘要

目的:研究骨肉瘤中显著高表达的miR-214-3p对骨肉瘤细胞凋亡的影响及相关作用机制.方法:以骨肉瘤细胞U2OS为研究对象,采用慢病毒感染方法,建立miR-214-3p的稳定转染细胞系,设置过表达negative control慢病毒为对照组,采用流式细胞术检测2组细胞凋亡情况,并对凋亡相关信号通路进行研究.结果:(1)流式结果显示,与对照组比较miRNA-214-3p稳转U2OS细胞系后凋亡细胞减少;(2)Dual-Glo Luciferase方法证实在U2OS细胞中miR-214-3p可以直接结合pten的3'UTR区域,WB实验证实miR-214-3p蛋白水平抑制pten;(3)miR-214-3p可以上调pAKT蛋白表达.结论:miR-214-3p通过直接靶向抑癌基因pten,活化AKT通路,抑制骨肉瘤细胞的凋亡从而在骨肉瘤中发挥了癌基因的作用,可能促进了骨肉瘤的进展.