骨关节炎患者成骨细胞胞外体miRNAs表达谱的差异

摘要

目的:通过分析骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者软骨下骨组织中成骨细胞胞外体miRNAs的表达差异,探究OA发生发展过程中可能涉及的关键胞外体miRNAs.方法:共纳入6名膝OA患者,收集其膝关节软骨下骨组织,选取磨损严重侧为OA组,取磨损较少侧为正常对照组.细胞培养后提取成骨细胞胞外体,进行特征鉴定.提取胞外体miRNAs,用高通量测序并筛选两组间表达差异显著者(log2Ratio≥2)进行靶基因预测分析,并进一步行定量反转录PCR分析.结果:提取物经鉴定为胞外体,在扫描电镜下呈囊泡状双层膜结构,直径30～200 nm,体积峰度50～150 nm.高通量测序共筛出5个OA组表达显著上调的miRNAs,差异倍数最大者为hsa-miR-4717-5p,预测靶基因为RGS2;定量反转录PCR亦显示OA组hsa-miR-4717-5p相对表达量较对照组显著增高(2.243 vs 0.480,P＜0.01).结论:OA患者成骨细胞胞外体miRNAs表达谱较正常者有显著差异.部分表达显著上调的miRNAs可能通过代谢相关通路介导OA的发生和发展.