人细胞色素P450 ZE1 cDNA在鼻咽癌细胞系CNE-2的稳定表达

摘要

目的:为进一步研究人细胞色素P450 E1(cytochro me P450 2E1, CYP2E1)蛋白对相关化学致癌物的体外代谢功能及其在化学物质鼻咽癌(nas opharyngeal carcinoma, NPC)变中的作用机制提供体外模型.方法:应用基因重组技术构建人CYP2E1 cDNA真核表达载体pcDNA3.1-2E1,并经脂质体介导转入CNE2细胞,通过G418筛选后挑选若干抗性细胞克隆扩大培养.结果:经Southern blot和Western blot对一系列抗性克隆细胞进行检测,获得2个具有外源CYP2E1 cDNA基因稳定整合和表达的细胞克隆C NE2-2E1-1及CNE2-2E1-2.结论:建立了可供CYP2E1代谢相关的化学致癌物筛选及CYP2E1在N PC癌变中作用机制研究的体外模型.