TNF-α和LPS对培养大鼠BBBEC胞间通讯的影响

摘要

目的:观察体外培养的血脑屏障内皮细胞(blood brain barrier endothelial cells,BBBEC)之间是否存在缝隙连接及在TNF-α和LPS刺激下BBBEC胞间通讯的改变.方法:利用荧光染料CFDA进行负载,在CLSM下用荧光光淬灭恢复技术观察BBBEC间缝隙连接介导的胞间通讯情况,并检测TNF-α和LPS对BBBEC胞间通讯的影响.结果:正常体外培养的BBBEC经荧光淬灭后,30s内出现荧光恢复,至120s达到高峰.与对照组相比,不同浓度TNF-α刺激BBBEC后,其胞间通讯的降低均有显著性意义(P<0.01);但在不同浓度TNF-α之间,胞间通讯的改变无显著性差异(P>0.05).与对照组相比,低浓度(1μg/ml)LPS不能显著地降低BBBEC的胞间通讯(P>0.05);但高浓度LPS可显著降低细胞间通讯(P<0.01).结论:体外培养的BBBEC间存在缝隙连接.TNF-α和LPS均可抑制BBBEC缝隙连接介导的胞间通讯.