GFP转基因鼠咀嚼肌卫星细胞的培养及影响因素

摘要

探索骨骼肌卫星细胞作为组织工程种子细胞的可能性.取新生绿色荧光蛋白(GFP)转基因鼠面部咀嚼肌,分离出肌卫星细胞,体外进行原代和传代培养,建立GFP转基因小鼠肌卫星细胞系.通过倒置显微镜观察肌卫星细胞的形态、生长曲线测定等,观察肌卫星细胞的增殖与分化能力,荧光显微镜观察GFP荧光的保持及表达,并观察不同浓度的FBS,IGF-1以及不同种植密度对肌卫星细胞生长的影响.结果表明:体外培养的咀嚼肌卫星细胞增殖速度快,15%的FBS,接种密度在5×104 cells/ml,IGF-1在100 ng/ml有显著的促进增殖作用.荧光显微镜观察发现,肌卫星细胞经传代后仍然保持其特有的GFP荧光表达.