柱前衍生化-HPCE法测定霍山石斛中游离氨基酸

摘要

cqvip:游离氨基酸作为中药炮制与食品加工过程中参与米拉德反应的底物,是影响中药炮制中组分变化和食品风味的关键物质。霍山石斛因其鲜品难以保存,临床以其加热炮制成干燥品的茎入药,开展霍山石斛游离氨基酸研究对于揭示霍山石斛炮制机制、霍山石斛资源综合利用具有重要意义。采用柱前衍生化-高效毛细管电泳法(HPCE)对霍山石斛中12种游离氨基酸进行定性定量分析,结果显示霍山石斛中游离氨基酸最佳毛细管电泳分离条件为:检测波长254 nm、pH 11的60 mmol/L硼砂+20 mmol/L磷酸氢二钠缓冲液、分离电压10 kV、毛细管有效长度50 cm。在该条件下,12种氨基酸可在60 min内实现基线分离,在最优分离条件下,构建了标准曲线并进行了方法学考察,测得霍山石斛根、茎、叶中总游离氨基酸含量分别为1.8958、 2.0736和2.5954 mg/g,各氨基酸线性相关系数R^2均大于0.99,加样回收率为90.17%~110.25%,RSD均小于5%(n=3)。方法准确、可靠、重现性较好,可用于霍山石斛中游离氨基酸的定性定量分析。