柱前衍生化

摘要： 目的探讨正交实验优选桑籽中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的提取工艺。方法采用柱前衍生—高效液相色谱法,以桑籽DNJ提取率为指标,在单因素实验的基础上,分别考察了浸提温度、乙醇浓度、盐酸浓度等因素对桑籽DNJ提取率的影响。进行了工艺优化的正交实验,确定了桑籽DNJ提取的最佳工艺。结果对提取时间、溶剂量、提取次数等进行单因素实验考察分析,差异无统计学意义(P>0.05);进一步对盐酸浓度、乙醇浓度及浸提温度进行正交实验方差分析,盐酸浓度对DNJ提取效果影响显著,差异有统计学意义(P<0.05)。综合考虑各因素确定最佳提取方案为:盐酸浓度0.05 mol/L、乙醇浓度50%、浸提温度70°C。在此条件下,桑籽中DNJ的提取率为0.59%。结论在盐酸浓度0.05 mol/L、乙醇浓度50%、浸提温度70°C的条件下桑籽中DNJ的提取率较高,该方法简单易行,可作为桑籽中DNJ的提取工艺。

摘要： 采用乙醇对氯乙酰氯及其多氯杂质(二氯乙酰氯、三氯乙酰氯)进行柱前衍生化,通过高效液相色谱法测定氯乙酰氯及其多氯杂质的含量。在选定的色谱条件下,即采用Hedera ODS-2液相色谱柱,以乙腈/水(60/40)为流动相(每500 mL流动相中含0.68 g磷酸二氢钾),检测波长为210 nm,氯乙酰氯及其多氯杂质衍生物能得到有效分离,并能获得较好的检测效果。氯乙酰氯、二氯乙酰氯、三氯乙酰氯的线性相关系数分别为0.9999、0.9995、0.9998,回收率分别为98.66%~99.63%、98.24%~101.63%、97.84%~102.45%,变异系数分别为0.42%、2.92%、3.27%,最低检出限分别为0.14 mg/L、0.24 mg/L、0.21 mg/L。

摘要： 建立柱前衍生高效液相色谱测定尼莫地平注射液中甲醛和乙醛含量的方法。以2,4-二硝基苯肼为衍生化试剂,室温反应30 min,采用高效液相色谱法检测,色谱柱为Waters XBridge C_(8)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(体积比为50∶50),等度洗脱,流量为1.0 mL/min,柱温为30°C,检测波长为360 nm,进样体积为20μL。甲醛、乙醛的色谱峰面积与质量浓度分别在0.01~1.00μg/mL、0.01~1.20μg/mL范围内线性关系良好,相关系数均为0.9999,测定结果的相对标准偏差分别为0.86%和1.02%(n=6),平均加标回收率分别为104.3%和92.0%。

摘要： 目的:建立一种利用HPLC同时测定食品接触橡胶密封垫圈中甲醛、乙醛和丙烯醛迁移量的分析方法。方法:以4%乙酸水溶液、10%乙醇水溶液、20%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液及橄榄油作为食品模拟物,按GB 5009.156—2016进行迁移试验,经衍生化反应后,采用Accucore RP-MS色谱柱分离,以乙腈—水溶液为流动相等度洗脱,紫外检测器检测。结果:3种醛类化合物在0.05~5.00 mg/L内呈良好的线性关系,相关系数R^(2)≥0.9983。甲醛、乙醛和丙烯醛检出限分别为0.58,0.62,1.68 mg/kg;定量限分别为0.98,0.99,2.93 mg/kg,在1.0~15.0 mg/kg添加水平范围内,3种醛类化合物回收率为81.0%~103.3%;相对标准偏差为0.78%~7.05%。结论:该方法适用于食品接触橡胶密封垫圈中醛类化合物迁移量的检测。

摘要： 本文通过构建多花黄精HPLC指纹图谱,结合多种化学计量学方法探讨不同产地多花黄精药材多糖的差异。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化-HPLC法,建立多花黄精多糖类成分的指纹图谱,对其单糖组成、总多糖含量进行分析,并采用相似度评价(SA)、聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)方法,对多花黄精指纹图谱进行模式识别研究。结果显示,不同产地多花黄精均含有半乳糖醛酸,葡萄糖醛酸,半乳糖,葡萄糖和木糖;13批多花黄精药材相似度在0.781~0.945之间,总多糖含量为7.18%~16.27%,HCA和PCA将不同产地的多花黄精分为2类,采集于湖南省慈利县的样本单独为一支。以上研究结果表明多花黄精药材多糖指纹差异较大,为保障黄精药材临床用药的有效和安全,有必要建立多花黄精的规范化栽培技术体系。

摘要： 采用化学衍生化-高效液相色谱法分别测定阿嗪米特原料药中潜在基因毒性杂质氯乙酰氯和氯乙酸。以2-硝基苯肼为衍生化试剂,经衍生化后以Thermo syncronis C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以0.1%磷酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱;柱温40°C,检测波长226 nm;流速1 mL/min。空白溶剂、衍生化试剂及阿嗪米特均不干扰待测物质出峰;氯乙酰氯和氯乙酸的检测限分别为7.5 ng/mL和15 ng/mL,均在30~300 ng/mL的范围内与色谱峰面积呈现良好的线性关系;加样回收率在87.37%~109.75%范围内。本研究所建立的两种方法专属性好、精密度好、灵敏度高、操作简便,可用于阿嗪米特原料药中潜在基因毒性杂质氯乙酰氯及氯乙酸的痕量测定。

摘要： 用氯乙酰氯对废水中的二甲胺进行柱前衍生化,通过高效液相色谱法可同时测定二甲基甲酰胺及二甲胺。采用 CAPCELL PAK ADME S5 液相色谱柱,流动相为乙腈/水(14/86),检测波长为210 nm。在选定的色谱条件下,二甲基甲酰胺及二甲胺衍生物能得到有效分离,并能获得较好的检测效果。分析结果表明,二甲基甲酰胺及二甲胺在 0~0.79 mg·L^(-1)(r=0.999 8)及 0~0.35 mg·L^(-1)(r=0.999 5)浓度范围内线性相关系良好,回收率为 99.52%~101.38%、98.77%~101.07%,变异系数为 1.69%、2.01%,最低检出限为 2.93μg·L^(-1)、3.16μg·L^(-1)。

摘要： 药物由于挥发性、稳定性等问题,难以进行气相色谱分析,通过衍生化反应对目标物进行结构改造,将其转化为高稳定或低沸点的衍生物后,可以大大提升被分析物的检测灵敏度以及分离效果。在药物分析的实际教学中,很少对气相色谱中衍生化的应用进行讨论总结,本文从教学角度讨论柱前衍生化在气相色谱中的应用种类,具体分为硅烷化、酰化、烷基化、酯化以及卤化衍生化;以期为教学提供理论基础。

摘要： 以4-(二乙氨基)水杨醛为原料,经缩合成环、水解反应合成一种结构新颖的香豆素类荧光衍生试剂7-(二乙氨基)-2-氧-2H-色酮-3-羧酸(记为L1);建立并优化L1与氟虫腈衍生化反应体系,优化后条件如下:催化缩合剂为1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐/4-二甲氨基吡啶,反应溶剂为二氯甲烷,L1与氟虫腈用量比为11∶1,反应时间为60 min,衍生温度为45°C;对衍生产物N-(3-氰基-1-(2,6-二氯-4-(三氟甲基)苯基)-4-((三氟甲基)亚磺酰基)-1H-吡唑-5-基)-7-(二乙氨基)-2-氧-2H-色酮-3-甲酰胺(记为SF1)进行分离和鉴定;在此基础上,建立氟虫腈柱前衍生化高效液相色谱-荧光检测方法,方法的检出限达到0.01μg/L,定量限为0.036μg/L。该方法具有较好的灵敏度、精确性和可靠性,可应用于农产品中氟虫腈残留的检测。

摘要： 目的:建立柱前衍生-高效液相色谱法测定食品中亚硝酸盐含量的检测方法。方法:样品经水超声提取,经对氨基苯磺酸与盐酸萘乙二胺衍生显色生成紫红色的偶氮化合物(目标物)后,用高效液相色谱仪进行检测分析。采用Agilent 5 TC-C_(18)(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,外标法定量。结果:目标物在0.015~0.250 mg/L呈良好的线性关系。高、中、低3水平浓度加标,提取回收率为83.3%~96.0%(n=6),相对标准偏差为1.1%~5.3%,日内精密度范围为1.0%~3.8%(n=6),日间精密度范围为2.3%~7.8%(n=3)。结论:该方法能够有效消除氯离子等阴离子和色素对本实验的干扰,建立的分析方法灵敏度、准确度、精密度和回收率好,适用于食品中亚硝酸盐的检测。

摘要： 本文建立了以柱前衍生化，质谱检测，快速测定生物样品中GSH含量的方法，具有极高的灵敏度和选择性，方便、快速、准确、专属性强。

摘要： 目的:建立异硫氰酸苯酯柱前衍生化高效液相色谱法测定复方制剂中盐酸氨基葡萄糖的含量。rn 方法:以氨基半乳糖为内标，异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂，采用Agilent TC C-18 (250 mm × 4．6 mm，5 μm)色谱柱，流动相为10 mmol·L -1pH 5.8 的磷酸盐缓冲液一乙腈(90︰10)，检测波长254 nm，流速为0.8 mL·min-1，柱温是30°C。rn 结果:盐酸氨基葡萄糖质量浓度在350 mg·L1～550 mg·L1范围内，经衍生化后其衍生物峰面积与内标衍生物峰面积的比值呈线性相关（r=0.9991）。制剂中盐酸氨基葡萄糖含量测定的平均回收率98．3％(RSD=2.3％)。rn 结论:异硫氰酸苯酯柱前衍生化高效液相色谱法测定结果准确灵敏、方法可靠，适用于复方制剂中等复杂样品中盐酸氨基葡萄糖的含量测定。

摘要： 目的:建立测定微球中牛磺酸含量的柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)法。方法:采用邻苯二甲醛(OPA)为柱前衍生化试剂,以C18色谱柱为分析柱,甲醇-醋酸盐缓冲液(pH5.3)(43:57)为流动相,检测波长为317nm,流速1ml·min-1。结果:牛磺酸在1.01.0～20.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),测得平均回收率为98.72％,RSD为1.01％,衍生物在30min内的稳定性良好,最低检出浓度为0.2μg·mL1-。结论:本方法简单,快速,专属性强,灵敏度高,重现性好,结果准确、可靠。

摘要： 目的：建立柱前衍生化高效液相色谱法测定阿卡波糖胶囊含量方法。方法：采用PhenomenexLunaNH2色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)，0.02mol/L磷酸二氢钠-乙腈（35:65）为流动相，流速:1.0mL/min，检测波长:346nm。结果：阿卡波糖在0..2～2.0mg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为99.5%，RSD=1.2%（n=6）。结论：本方法简便、快速、结果准确，重现性好。

摘要： 使用柱前衍生化试剂通过HPLC,外消旋混合物可以被常规ODS柱分开。2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯(GITC)作为一种好的手性衍生试剂,在实验室自行合成并且产率达到44.7％。以GITC做柱前手性衍生化试剂,在高效液相色谱(HPLC)上用C18柱成功分离了一些脂肪族氨基酸对映体。本文探讨了利用HPLC对脂肪氨基酸柱前衍生化后的手性分析。

摘要： 目的:建立测定溃疡乳膏中硫酸新霉素含量的柱前衍生化反相高效液相色谱法.方法:采用Dikma Technologies C18(5μ,4.6mm×250mm)色谱柱,以甲醇-水(40:60)(含0.2mol/L醋酸和0.013mol/L庚烷磺酸钠)为流动相,检测波长为390nm.结果新霉素在1.0312μg/ml-7.962μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9996),方法重现性RSD=l.29％,平均回收率为97.5％.结论:此法简便、快速,可作为溃疡乳膏中硫酸新霉素的含量测定.

摘要： 目的：建立HPLC法测定美洲大蠊药材中氨基酸含量的方法。方法：用盐酸水解、邻苯二甲醛和p—巯基乙醇柱前衍生，0．50%磷酸二氢钠缓冲液(pH7．80)-甲醇-乙腈为流动相，柱温：35°C，检测波长：338nm，梯度洗脱后测定氨基酸的含量。结果：各氨基酸衍生物在40分钟内均能得到良好的分离，r值为0．999 0~1.0000(n=6)，平均回收率为92．34％~103．9％，RSD为1．18％~4．76％。结论：该方法简便、准确、重现性好，可作为美洲大蠊中氨基酸的含量测定。

摘要： 氟乙酸类鼠药已经成为刑事中毒案件中最常见的毒物之一。本文建立了使用N,N-二乙基对苯二胺和N,N,-二环己烷碳酰亚胺直接衍生化氟乙酸钠,并用液相色谱分析的方法.杀鼠剂中氟乙酸钠在浓度0.50～50.0μg/mL范围具有良好的线性关系,最低检出限为0.10μg/mL.该方法灵敏、实用、可靠,适用于该类刑事案件中氟乙酸钠的快速检验。

摘要： 目的:建立同时测定复方甘草酸苷片中甘氨酸和蛋氨酸含量的高效液相色谱法。rn 方法:采用C18色谱柱(4.6×150mm,5μm),流动相为乙腈-0.01mol·L-1磷酸溶液(49:51),流速1.0mL·min-1,检测波长262nm。rn 结果:甘氨酸、蛋氨酸浓度分别在10.6μg·mL-1-106.0μg·mL-1、10.4μg·mL-1-104.0μg·mL-1范围内呈良好的线性关系；平均回收率分别为100.53%和100.66%,RSD分别为1.08%和1.13%(n=9)。rn 结论:本法可用于同时测定复方甘草酸苷片中甘氨酸和蛋氨酸的含量,方法简便,结果准确。

摘要： 目的:建立柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法测定L-肌肽对映体的纯度。方法:以邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)为手性衍生化试剂，反应生成具有荧光吸收的一对非时映异构体衍生物，采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流速1.0mL·min-1，50mmol·L-1醋酸铵缓冲溶液(pH6.0)-甲醇(70：30)流动相，柱温35°C，激发波长350nm，发射波长450 nm。结果:L-肌肽与其光学异构体分离度大于3，在0.104～2.68 mg·L-1范围内，D-肌肽衍生物色谱峰面积与其浓度呈良好线性关系，检测限浓度为0.02μg·mL-1。结论:建立的L-肌肤光学异构体杂质手性衍生化HPLC拆分检查法方便准确，可用于L-肌肤的光学纯度控制。

摘要： 本发明公开了一种豆酱中生物胺的分离和液相色谱柱柱前衍生化方法，包括以下步骤：(1)向豆酱中加入三氯乙酸溶液，均质，离心，收集上清液；(2)向上清液中加入正己烷，振荡，静止分层后取出下层三氯乙酸相，备用；(3)向三氯乙酸相中加入NaOH溶液，再加入NaHCO3溶液缓冲，混合丹磺酰氯丙酮溶液进行衍生；(4)氨水去除丹磺酰氯终止反应，得到衍生液，过滤。本发明分离方法处理过程简单，消耗试剂少，避免了转移时所造成的分析物损失。经本发明分离净化后可达到检测要求，谱图杂峰干扰少且待测物损失小，生物胺的回收率可达到80％以上。本发明方法确定了衍生生物胺的最佳条件，丹磺酰氯衍生产物稳定，检测灵敏度高。

摘要： 本发明公开了一种柱前衍生化法测定AE‑活性酯纯度的方法，属于药物分析技术领域。包括以下步骤：(1)取AE‑活性酯，加入硼氢化钠溶液中摇匀；(2)取步骤(1)制备的溶液1ml置于100ml容量瓶中，在30°C水浴中保持1小时后取出放至室温，用溶剂稀释至刻度，作为供试品溶液；(3)色谱条件为：C18 150mm×4.6mm×5.0μm，检测波长为254nm，流速为1ml·min‑1，流动相为水‑乙腈；取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积归一化法计算纯度。本发明方法采用柱前衍生化法测定AE‑活性酯纯度，避免了直接测定时发生水解，衍生试剂为硼氢化钠的甲醇溶液，方法简单易行，准确度高。

摘要： 本发明公开了一种MSX残留的HPLC柱前衍生化检测方法。包括精密吸取标准溶液或待测溶液加入离心管中，加入三乙胺溶液和异硫氰酸苯酯溶液，混匀后室温反应，再加入正己烷混匀，静置，取下相滤膜过滤后得到衍生化标准品或衍生化待测样品；分别将衍生化标准品或衍生化待测样品上样到HPLC柱中检测；按照上述HPLC检测的色谱条件进样分析，以标准溶液的不同浓度梯度浓度x、峰面积y绘制标准曲线；再将待测溶液的MSX的峰面积代入所得的标准曲线，从而计算出待测溶液中MSX的含量。快速方便、准确度高、重复性好，成本低，适用性好，能满足不同MSX残留量水平的检测需要，在药物研发和生产的质量控制中具有极大的应用价值。

摘要： 本发明属于药物分析技术领域，建立柱前衍生化法测定头孢洛林酯侧链酰氯纯度的方法。本发明技术方案包括以下步骤：取头孢洛林酯起始物料侧链酰氯约100mg，加入三乙胺溶液5ml，摇匀，转移至50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度；取第一步所制备的溶液5ml置于适宜的容器中，在40°C水浴中保持30分钟，转移至50ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为供试品溶液，高效液相色谱法进行测定其纯度。

摘要： 本发明公开了一种柱前衍生化法和发酵乳制品中组胺的检测方法。柱前衍生化法包括下述步骤：(1)将待测样品进行预处理：待测样品在高氯酸水溶液中混合反应后，离心，取上清液，用高氯酸水溶液配制成浓度为50～250g/L的预处理后的待测样品；(2)将预处理后的待测样品中加入内标溶液后，在衍生化条件下进行衍生化反应后，除去衍生化反应过程中的丙酮，再用溶剂萃取，取萃取相。本发明的柱前衍生化条件在后续组胺的检测过程中，简便、高效、准确性和精度均较高，能够满足实验室、工厂等需要精确检测乳制品中组胺含量的要求。

摘要： 本发明公开了一种豆酱中生物胺的分离和液相色谱柱柱前衍生化方法，包括以下步骤：(1)向豆酱中加入三氯乙酸溶液，均质，离心，收集上清液；(2)向上清液中加入正己烷，振荡，静止分层后取出下层三氯乙酸相，备用；(3)向三氯乙酸相中加入NaOH溶液，再加入NaHCO3溶液缓冲，混合丹磺酰氯丙酮溶液进行衍生；(4)氨水去除丹磺酰氯终止反应，得到衍生液，过滤。本发明分离方法处理过程简单，消耗试剂少，避免了转移时所造成的分析物损失。经本发明分离净化后可达到检测要求，谱图杂峰干扰少且待测物损失小，生物胺的回收率可达到80％以上。本发明方法确定了衍生生物胺的最佳条件，丹磺酰氯衍生产物稳定，检测灵敏度高。

摘要： 本发明公开了一种柱前衍生化法测定维格列汀中3‑氨基‑1‑金刚烷醇残留量的方法，属于医药分析检测技术领域；采用衍生试剂制备得到3‑氨基‑1‑金刚烷醇对照品衍生溶液以及维格列汀供试品衍生溶液，将上述衍生物溶液进行高效液相色谱分析，采用外标法按峰面积计算3‑氨基‑1‑金刚烷醇残留。本发明的液相色谱分析方法能够准确灵敏地检测维格列汀中3‑氨基‑1‑金刚烷醇的残留量，从而保证维格列汀原料药的质量。

摘要： 本发明公开了一种柱前衍生化法测定AE‑活性酯纯度的方法，属于药物分析技术领域。包括以下步骤：(1)取AE‑活性酯，加入硼氢化钠溶液中摇匀；(2)取步骤(1)制备的溶液1ml置于100ml容量瓶中，在30°C水浴中保持1小时后取出放至室温，用溶剂稀释至刻度，作为供试品溶液；(3)色谱条件为：C18 150mm×4.6mm×5.0μm，检测波长为254nm，流速为1ml·min

摘要： 本发明公开了一种柱前衍生化HPLC法分析N‑(对甲苯磺酰基)‑L‑丙氨酰氯及其对映异构体的方法，采用多糖衍生物涂覆型手性色谱柱或蛋白质键合型手性色谱柱进行分析检测。该方法能够简单、准确、高效的分析检测N‑(对甲苯磺酰基)‑L‑丙氨酰氯及其对映异构体，有效控制其质量。

摘要： 本发明公开了一种柱前衍生化HPLC‑MS/MS检测桂花中单糖组分的方法。本发明以1‑苯基‑3‑甲基‑5‑吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化为前处理手段，采用高效液相色谱与电喷雾电离质谱联用对桂花中的6种单糖成分进行同时测定，方法简单、灵敏、选择性高、分离效率高、进样量少、分析时间短、多模式测定等优点，为桂花中多糖的单糖成分研究提供科学依据。该方法同时为其他天然产物的研究奠定了基础。