拟南芥VSP2蛋白的重组表达及其酸性磷酸酶活性的测定

王进; 史竹兵; 张敏

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拟南芥VSP2蛋白的重组表达及其酸性磷酸酶活性的测定

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通过PCR扩增从拟南芥cDNA文库中得到VSP2蛋白的编码序列,将其构建到原核表达载体pET-22b上,并在大肠杆菌BL21茵株中实现高效可溶表达.经过Ni-NTA亲和层析一步纯化,获得电泳纯的重组VSP2蛋白.以pNPP为底物检测,该蛋白具有酸性磷酸酶活性,反应的最适pH值4.5,最适温度为45℃,Km值为26.2mM.重组VSP2蛋白表达量高,纯化后均一性好,适于蛋白晶体生长.

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来源
《生物学杂志》 |2009年第6期|53-55|共3页
作者
王进; 史竹兵; 张敏;
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作者单位

安徽大学生命科学学院,合肥,230039;

安徽大学生命科学学院,合肥,230039;

安徽大学生命科学学院,合肥,230039;

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正文语种 chi
中图分类基因的结构和突变的分子原理;
关键词
拟南芥VSP2蛋白; 克隆表达; 酸性磷酸酶活性; 晶体生长;

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