TR3受体激动剂6-mercaptopurine对糖尿病ApoE-/-小鼠NF-κB p65/CylinD1通路影响及其与抗动脉硬化关系

摘要

目的:观察TR3受体激动剂(6-mercaptopurine,6-MP)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE-/-)敲除糖尿病小鼠糖脂代谢及NF-κBp65/CylinD1通路的影响及其与抗动脉硬化的关系,探讨TR3受体在改善糖尿病动脉粥样硬化可能机制。方法:40只雄性ApoE^-/-小鼠随机分为4组:ApoE^-/-组、STZ-ApoE^-/-组、STZ-ApoE^-/-+6-MP5(5mg·kg^-1·d^-1)组、STZ-ApoE^-/-+6-MP10(10mg·kg^-1·d^-1)组,每组10只;6-MP腹腔注射法给药,每天1次,连续8周;STZ60mg/kg腹腔注射ApoE^-/-小鼠建立糖尿病动脉粥样硬化模型,血糖试纸法测血糖水平;酶法或匀相法测血脂水平;蛋白免疫印迹试验(Western-blotting)测胸主动脉组织NF-κBp65/CylinD1蛋白水平;油红O染色观察胸主动脉内膜动脉脂质沉积;HE染色测胸主动脉内膜粥样斑块面积。结果:与ApoE^-/-组相比,STZ-ApoE^-/-组血糖及血清TG、TCHO、LDL-C均显著增高(P<0.05);TR3受体激动剂6-MP呈剂量依赖性降低糖尿病ApoE^-/-小鼠血糖、血脂水平,与STZ-ApoE^-/-组相比,STZ-ApoE^-/-+6-MP5组血糖、TG、LDL-C、TC均显著降低(P<0.05),与ApoE^-/-组相比,STZ-ApoE^-/-组胸主动脉NF-κB p65、CylinD1蛋白表达水平均显著增加(P<0.05);6-MP呈剂量依赖性降低糖尿病ApoE^-/-小鼠胸主动脉NF-κB p65/CylinD1蛋白表达,STZ-ApoE^-/-+6-MP5组NF-κBp65/CylinD1蛋白表达水平均明显低于STZ-ApoE^-/-组(P<0.05);STZ-ApoE^-/-+6-MP10组与STZ-ApoE^-/-+6-MP5组之间胸主动脉NF-κBp65/CylinD1蛋白表达水平差异均有统计学意义(P<0.05)。油红O染色显示:TR3受体激动剂6-MP可呈剂量依赖性抑制STZ-ApoE^-/-小鼠胸主动脉内膜脂质沉积;HE染色显示:TR3受体激动剂6-MP可呈剂量依赖性降低STZ-ApoE^-/-小鼠胸主动脉内膜斑块面积,减少斑块内部有空洞(脂质)形成,抑制斑块周围组织及斑块基底部平滑肌层增生,与STZ-ApoE^-/-组相比,STZ-ApoE^-/-+6-MP5组胸主动脉内膜斑块面积明显减小(P<0.05),STZ-ApoE^-/-6-MP10组斑块面积进一步减小(P<0.01)。结论:TR3激动剂6-MP可明显降低糖尿病ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的形成,其机制可能与其改善糖脂代谢,抑制NF-κBp65/CylinD1信号通路有关。