巴伦葛兹类芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶的表达、酶学性质及结构解析

摘要

从克隆巴伦葛兹类芽孢杆菌CAU904中克隆得到一个β-葡萄糖苷酶基因,并在大肠杆菌中进行了异源表达,研究了重组酶的酶学性质,进一步解析了该酶的晶体结构.研究结果表明,该酶的最适温度和pH值分别为50℃和7. 5.该酶底物特异性较广,能够水解β-1,2、β-1,3、β-1,4、β-1,6-糖苷键等在内的多种糖苷键,对昆布多糖、大麦β-葡聚糖和地衣多糖等聚糖均有水解作用.晶体结构信息表明,该酶呈现糖苷水解酶( GH) 3 家族典型的多结构域结构,其催化口袋由类似( α/β)5的三明治结构域和( β/α)8折叠桶结构域中间的loop构成,其中芳香氨基酸残基Trp748侧链提供-1位结合位点,Trp749侧链提供+1位结合位点,Trp131侧链提供+2位结合位点,这些芳香氨基酸残基形成了一个小的口袋和疏水性环境,不利于转糖苷反应.