茶黄素的分离纯化及降糖活性研究

摘要

开展分离纯化红茶中茶黄素及其降糖活性研究具有重要意义。通过聚酰胺柱层析和高速逆流色谱分离茶黄素,研究其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用并通过分子对接分析其分子机制。结果表明,聚酰胺柱层析上样浓度2 mg/mL,上样溶液pH为5,上样流速1 mL/min,洗脱液为乙醇∶丙酮(50∶1),洗脱流速1 mL/min,可去杂富集,茶黄素的纯度由15.21%提高至62.48%。再经高速逆流色谱分离获得6个组分,其中F3、F4、F5、F6经HPLC与MS鉴别分别为茶黄素(TF1)、茶黄素-3-单没食子酸酯(TF2A)、茶黄素-3'-单没食子酸酯(TF2B)和茶黄素-3,3'-双没食子酸酯(TF3)。α-葡萄糖苷酶的IC 50分别为0.26、0.38、0.08、0.05 mg/mL,优于阳性对照品阿卡波糖(IC 501.37 mg/mL)。分子对接分析初步表明,TF1通过氢键作用与α-葡萄糖苷酶活性位点上的氨基酸残基结合抑制α-葡萄糖苷酶的活性。本研究结果为茶黄素深度开发提供有益的理论技术参考。