猪链球菌2型epf基因的原核表达及其蛋白纯化

摘要

为了克隆、表达SS2菌株epf基因片段,分析蛋白活性,根据GenBank SS2 epf基因序列设计引物,克隆epf基因片段并进行序列分析,构建原核表达质粒pGEX4T-2epf,在大肠杆菌中诱导带有GST标签的融合蛋白rEF-GST的表达;亲和层析法纯化融合蛋白rEF-GST,用凝血酶切除重组蛋白中的GST,获得纯化的EF抗原.经Western blot鉴定,EF可与SS2多克隆抗血清发生特异性反应.