牛支原体广西分离株P48的原核表达及蛋白纯化研究

摘要

为获得牛支原体P48蛋白,以提供免疫学诊断产品及疫苗开发原材料,研究运用PCR方法扩增牛支原体广西分离株的脂蛋白P48的编码基因,构建pET32a-P48重组质粒,导入BL21感受态细胞,在诱导剂异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导作用下获得P48重组蛋白并进行纯化,然后以纯化蛋白免疫小鼠,借助间接ELISA测定血清抗体效价.结果 显示,成功构建了P48重组蛋白表达载体,纯化的P48重组蛋白能刺激小鼠产生良好的免疫反应,三免后血清效价达到6.25×105.