小鼠Klf4基因的原核表达研究

摘要

[目的]对小鼠Klf4基因重组蛋白进行原核表达分析.[方法]利用双酶切从重组质粒pMXs-Klf4上回收小鼠Klf4基因片段,克隆入pET-41a(+)载体后转化BL21大肠杆菌,用IPTG诱导表达,探讨诱导表达最佳浓度和时间,最后采用SDS-PAGE对重组蛋白进行鉴定及分析.[结果]重组质粒Klf4-pET-41a(+)在IPTG诱导下可表达与预期相符的约为51 ku的KLF4蛋白;经IPTG刺激后重组蛋白表达增多,以0.8 mmol/L IPTG诱导6h为佳;重组蛋白以包涵体形式存在于大肠杆菌BL21中.[结论]小鼠Klf4基因可在原核细胞中表达.