欧白英悬浮细胞原生质体培养和植株再生

摘要

本文报道了欧白英细胞悬浮系的建立和原生质体培养技术。从欧白英悬浮细胞分离原生质体，以含２％ＲｈｏｚｙｍｅＨＰ１５０，２％ＭｅｉｃｅｌａｓｅＣＥＳＢ和０．０３％ＭａｃｅｒｏｚｙｍｅＲ－１０的混合酶液效果最好，平均每克细胞团可得到２．０５×１０６个原生质体。悬浮系在继代培养第４天分离的原生质体植板率最高，在液体培养基中原生质体接种密度以１．５×１０５个·ｍＬ－１最佳，植扳率可达到２４．４３％。培养５０天后，约有０．２１％的原生质体形成１～２ｍｍ大的细胞克隆。将它们转到Ｋ８培养基上，形成愈伤组织块。再转入ＭＳＺ培养基，２～４周即有３０％～４０％分化出不定芽，长出枝条。再将幼枝转入不含激素的ＭＳ培养基，２周后大部分枝条生根，长成植株。