新城疫北京强毒株融合糖蛋白（F）基因的克隆及序列分析

摘要

ＮＤＶ北京强毒株Ｆ４８Ｅ９经ＳＰＦ鸡胚增殖，超速离心纯化，异硫氰酸胍法提取病毒ＮＡ后，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增，得到其融合糖白基因。将扩增产物与ｐＧＥＭ＾Ｒ－Ｔ载体相连接转化，经过ＡｍｐＩＰＴＧ－Ｘｇａｌ（ＡＩＸ）平板筛选，ＨｉｎｄⅢ酶切及ＰＣＲ鉴定，初步获得了含Ｆ基因的阳性克隆。用渐近法对克隆片段进行全序列分析，证明得到了作长１７４４个核苷酸的ＮＤＶ Ｆ蛋白基因。