抗菌肽基因在毕赤酵母中分泌表达及其条件优化

摘要

用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的抗菌肽cecropin A(1-8)-melittin(1-18)基因片段,合成片段与酵母表达载体pPIC9K重组,构建胞外分泌表达载体pPIC9K-came,电击法转化毕赤酵母(Pichiapastoris)SMD1168宿主菌,对CAME抗菌肽重组酵母菌的摇瓶发酵条件进行了优化.结果表明,酵母表达抗菌肽具有抗菌活性且溶血活性显著降低;重组酵母在含2%葡萄糖pH 7.0的YPD培养液中,250 r/min震荡培养24 h后,重组酵母菌的A600为6.0时,经0.5%甲醇在28℃条件下诱导48 h能够诱导产生较高抗菌活性的抗菌肽.